赛默飞Thermo实时荧光定量PCR仪 CFX96 特点

赛默飞Thermo实时荧光定量PCR仪 CFX96 全面介绍

实时荧光定量PCR（Quantitative Polymerase Chain Reaction, qPCR）是一种基于荧光信号检测的分子生物学技术，用于实时监测和定量分析DNA或RNA扩增过程。赛默飞（Thermo Fisher Scientific）作为生命科学技术公司，其CFX96实时荧光定量PCR仪以高灵敏度、高准确性和灵活性广受认可，是一款适用于科研、临床诊断以及工业应用的高性能仪器。本文将从CFX96的特点、技术参数、操作流程及应用领域等方面，全面介绍这一仪器。

一、仪器概述

赛默飞CFX96实时荧光定量PCR仪是一款以96孔板为基础的高通量、高灵敏度的qPCR仪器。CFX96专为满足基因检测、表达分析、病原体检测、基因分型及突变研究等多种实验需求而设计。其核心特点是拥有强大的光学检测系统、快速高效的温控系统以及直观易用的软件支持，为用户提供了灵活的实验方案和可靠的数据支持。

CFX96兼容多种荧光标记体系（如SYBR Green、TaqMan探针等），具有开放式平台设计，适应性强。仪器通过精准的荧光信号检测实现对样品扩增过程的实时监控，为科学研究提供精准的实验数据。

二、主要特点

1. 多通道光学系统

CFX96配备了先进的5通道光学检测系统，可同时监测多达5种荧光信号。这种多通道设计支持多靶标检测，使得单次实验能够检测多种基因，为基因表达研究和复杂分子诊断提供了强大的工具。

2. 高灵敏度和宽动态范围

CFX96采用高性能光学检测模块，能够检测低至单拷贝的DNA或RNA，灵敏度。同时，其宽动态范围允许从高浓度到低浓度样品的准确定量分析，确保实验数据的准确性和重复性。

3. 快速高效的温控系统

CFX96使用Peltier加热模块，提供了快速升降温的能力，使PCR反应更高效。其温控均一性可达±0.2℃，在样品间提供一致的扩增条件，确保数据的可靠性。

4. 灵活的试剂兼容性

CFX96是一款开放式平台，支持多种试剂体系，如SYBR Green染料、TaqMan探针和分子信标等。用户可以根据实验需求选择适合的试剂和耗材，降低实验成本，同时提高实验设计的灵活性。

5. 用户友好的软件系统

CFX96配备了强大的配套软件，支持以下功能：

• 绝对定量：通过标准曲线法确定未知样品的浓度；

• 相对定量：分析不同条件下目标基因的表达变化；

• 基因分型：区分不同基因型；

• 熔解曲线分析：用于区分特异性扩增和非特异性扩增产物；

• 突变分析：用于基因突变位点检测。

软件界面简洁直观，实验设置和数据分析功能丰富，降低了用户的操作难度。此外，软件支持实验报告自动生成和多种数据导出格式，便于实验结果分享和归档。

6. 高通量能力

CFX96支持96孔板格式，适合中高通量实验需求。其快速PCR模式可显著缩短实验时间，为时间紧迫的实验提供了解决方案。

7. 紧凑设计与多功能性

CFX96设计紧凑，占用实验室空间小，适合各类实验室环境。其灵活性和多功能性使其在科研和应用实验中都表现出色。

三、技术参数

1. 光学性能

• 光学系统：5通道独立光学检测；

• 荧光染料：支持SYBR Green、FAM、HEX、VIC、ROX、Texas Red、Cy5等多种荧光标记；

• 动态范围：可检测10个数量级；

• 灵敏度：单拷贝靶标检测。

2. 温控性能

• 样品模块：96孔板；

• 温控范围：4℃至99.9℃；

• 温控均一性：±0.2℃；

• 升降温速度：最高可达5℃/秒。

3. 数据分析

• 分析功能：支持标准曲线绘制、Ct值计算、熔解曲线分析、基因分型等；

• 导出格式：兼容.xlsx、.txt、.pdf等多种格式。

4. 兼容性

• 试剂：支持多种荧光染料和探针试剂；

• 耗材：适配标准96孔板及PCR管。

5. 尺寸与重量

• 仪器尺寸：约33 cm × 50 cm × 50 cm；

• 重量：约30 kg。

四、操作流程

1. 样品制备

从实验材料（如组织、血液、细胞）中提取DNA或RNA，通过逆转录将RNA转化为cDNA（若为RNA样品）。配置PCR反应体系，包括引物、探针或荧光染料、反应缓冲液及模板DNA或cDNA。

2. 仪器设置

• 打开CFX96仪器，启动软件；

• 根据实验设计选择检测模式（SYBR Green、TaqMan探针等）；

• 配置扩增程序，包括退火温度、循环次数等；

• 分配荧光通道和目标基因信息。

3. 实验运行

将样品加载至96孔板中并密封，将样品板放入仪器中，启动实验程序。CFX96将实时监测扩增过程并记录荧光信号。

4. 数据分析

实验完成后，软件自动生成扩增曲线、Ct值和熔解曲线等实验结果。用户可以进一步分析数据，并根据实验需求导出或保存结果。

五、应用领域

CFX96实时荧光定量PCR仪因其高灵敏度、多功能性和灵活性，被广泛应用于以下领域：

1. 基因表达研究

利用相对定量方法，研究目标基因在不同条件下的表达水平，为基因功能研究和生物学机制探索提供数据支持。

2. 病原体检测

检测和定量分析微生物、病毒和其他病原体的核酸，广泛应用于传染病诊断、食品安全检测及环境监测。

3. 基因分型

通过荧光信号区分不同基因型，应用于个体化医疗、遗传病筛查和药物基因组学研究。

4. 突变分析

检测单核苷酸多态性（SNP）和基因突变，用于癌症研究、药物开发及精准医疗。

5. 分子诊断

CFX96在遗传性疾病检测、肿瘤标志物分析和药物靶点研究中具有重要作用，为分子诊断领域提供技术支持。

6. 药物研发

支持高通量基因表达筛选和药物毒理学研究，用于分析药物对基因表达的影响和潜在靶点的筛选。

六、优势总结

1. 高性能光学系统：CFX96支持多通道实时检测，提供精确可靠的数据。

2. 灵活开放的设计：兼容多种试剂和耗材，适应不同实验需求。

3. 高通量能力：96孔板设计适合中高通量实验，支持快速模式。

4. 用户友好软件：操作简单，数据分析功能强大，适合不同层次用户。

5. 广泛应用领域：涵盖基础研究、临床诊断及工业应用。

七、总结

赛默飞CFX96实时荧光定量PCR仪是一款高性能、多功能、灵活的qPCR仪器，适用于多种分子生物学研究和临床诊断需求。其先进的光学检测技术、高灵敏度、宽动态范围和高通量实验能力，使其成为基因检测、病原体分析和精准医疗研究的理想选择。CFX96不仅能满足现代科研对高精度数据的需求，也能在未来的分子诊断和生物技术开发中继续发挥重要作用，为推动科学进步提供强有力的支持。